超微量分光光度計校準方式

發(fā)布時間：2025-06-09

以下是詳細解析，涵蓋核心步驟、技術要點及注意事項：

一、儀器自校準功能

1. 原理與目的

  超微量分光光度計通常內置自校準程序，通過儀器自帶的標準參數(shù)(如暗電流校正、光源強度補償)對光學系統(tǒng)進行初始化標定。

自校準可快速修正電子漂移、光源老化等引起的偏差，是日常維護的基礎步驟。

2. 操作步驟

  (1) 進入儀器菜單，選擇“自校準”或“性能驗證”模式；

（3) 儀器自動調整至出廠預設參數(shù)，并生成校準報告。

3. 局限性

  自校準無法糾正波長偏移或光路物理變化(如光纖位移)，需結合其他方法定期驗證。

二、外部標準溶液校準

1. 適用場景

  當儀器用于定量分析(如核酸、蛋白濃度測定)時，需通過標準溶液驗證吸光度準確性。

  常用標準物質包括：

  (3) NIST追溯標準溶液(如重鉻酸鉀溶液)：用于多波長交叉驗證。

2. 操作要點

 (3)空白對照：使用同批次溶劑(如超純水)作為參比，避免溶劑雜質干擾。

三、波長校準

1. 必要性

  波長準確性直接影響定性分析(如特征吸收峰識別)。

  超微量儀的氙燈光源或LED光源可能發(fā)生波長漂移，需定期校驗。

2. 校準方法

 (3) 軟件校準：部分機型支持自動掃描標準濾光片，通過算法修正波長偏移。

四、穩(wěn)定性與重復性檢測

1. 短期穩(wěn)定性

 (1)連續(xù)測量同一標準樣品(如1 mg/mL BSA溶液)至少6次，記錄吸光度值(如280 nm下誤差應<±0.005 OD)；

 (2)使用標準溶液周期性驗證(如每周一次)，記錄偏差趨勢。

五、特殊注意事項

1. 基座清潔與維護

 (2)定期檢查光纖探頭是否磨損，避免光損失。

2. 環(huán)境控制

 (2)避開強電磁場(如離心機、微波爐)，防止信號噪聲。

3. 溯源性與合規(guī)性